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        2024四川綿陽知識大全:細胞pcr實驗方法

        發布:2023-09-18 02:17:00編輯:視頻君來源:視頻教程網

        【2024四川綿陽知識大全:細胞pcr實驗方法】:今天小視頻助手分享的內容是——PCR試驗的步驟,,,,,小視頻將詳細內容整理如下: PCR反應的三個步驟是什么?
        PCR反應的三個步驟是什么?
        提示:

        PCR反應的三個步驟是什么?

         標準的PCR過程分為三步(如圖所示):
          1.DNA變性(90℃-96℃):雙鏈DNA模板在熱作用下,
          氫鍵斷裂,形成單鏈DNA
          2.退火(復性)(40℃-65℃):系統溫度降低,引物與
          DNA模板結合,形成局部雙鏈.
          3.延伸(68℃-75℃):在Taq酶(在72℃左右最佳的活
          性)的作用下,以dNTP為原料,從引物的5′端→3′ 端延
          伸,合成與模板互補的DNA鏈.
          每一循環經過變性、退火和延伸,DNA含量既增加一倍.
          現在有些PCR因為擴增區很短,即使Taq酶活性不是最佳也能在很短的時間內復制完成,因此可以改為兩步法,即退火和延伸同時在60℃-65℃間進行,以減少一次升降溫過程,提高了反應速度.

        PCR試驗的步驟
        提示:

        PCR試驗的步驟

         標準的PCR過程分為三步(如圖所示):
          1.DNA變性(90℃-96℃):雙鏈DNA模板在熱作用下,
          氫鍵斷裂,形成單鏈DNA
          2.退火(復性)(40℃-65℃):系統溫度降低,引物與
          DNA模板結合,形成局部雙鏈.
          3.延伸(68℃-75℃):在Taq酶(在72℃左右最佳的活
          性)的作用下,以dNTP為原料,從引物的5′端→3′ 端延
          伸,合成與模板互補的DNA鏈.
          每一循環經過變性、退火和延伸,DNA含量既增加一倍.
          現在有些PCR因為擴增區很短,即使Taq酶活性不是最佳也能在很短的時間內復制完成,因此可以改為兩步法,即退火和延伸同時在60℃-65℃間進行,以減少一次升降溫過程,提高了反應速度.

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